Анализ ПЦР на гепатит С: качественный, количественный, расшифровка

Определение патологии с помощью исследования ПЦР

ПЦР (или полимеразная цепная реакция) — это введенный Кэри Муллисом (США) лабораторный способ диагностики ДНК и РНК возбудителя. Достаточно всего одной молекулы, обнаруженной в коже или биологической жидкости, чтобы высокочувствительный ПЦР-анализ выявил вирус-возбудитель.

Генотипирование гепатита С — необходимая процедура, которая иногда способна спасти жизнь человеку. Существует ряд заболеваний, которые на первоначальном этапе протекают бессимптомно, но способны значительно ухудшить качество жизни и даже привести к преждевременной смерти.

ВАЖНО! Для того, что бы сохранить статью в закладки, нажмите: CTRL D

Задать вопрос ВРАЧУ, и получить БЕСПЛАТНЫЙ ОТВЕТ, Вы можете заполнив на НАШЕМ САЙТЕ специальную форму, по этой ссылке {amp}gt;{amp}gt;{amp}gt;

Не все знают, для чего используют метод диагностики ПЦР на гепатит С. Одной из широко распространенных групп заболеваний являются инфекционные болезни органов желудочно-кишечного тракта. Чаще всего страдают желудок (язвы), кишечник (колиты, энтериты) и печень (гепатиты).

На печень среди всех вышеперечисленных органов возлагается наибольшая нагрузка. В организме роль печени крайне важна:

  1. Практически все реакции метаболизма протекают в печени (именно здесь образуются все виды жизненно необходимых компонентов, позволяющих организму полноценно функционировать).
  2. Печень является главным органом, осуществляющим детоксикационную функцию. С ее помощью (в частности, через желчь) производится удаление многих субстратов, способных вызвать интоксикацию и привести к тяжелым последствиям.

К сожалению, многие люди не следят за своим здоровьем, из-за чего начинает страдать печень. Обычно развиваются гепатиты различной этиологии (вирусные, токсические).

Гепатит С — вирусное заболевание печени, вызываемое флавивирусом HCV (от англ. hepatitis C virus), в структуре которого содержится молекула рибонуклеиновой кислоты (РНК). РНК несет генетический код вируса. Ее наличие позволяет проводить анализ ПЦР на гепатит С.

Опасность HCV для человека заключается и в том, что так называемое серологическое окно (промежуток времени между заражением и появлением реакции со стороны иммунной системы) может быть достаточно длительным — от нескольких недель до шести месяцев.

Это не дает обнаружить инфицирование и начать лечение вовремя.

В зависимости от индивидуальных особенностей организма носителя HCV может проявляться в острой форме, а также протекать как хроническое заболевание, которое потребует длительного и дорогостоящего лечения. При выявлении антител к HCV проводится ряд лабораторных анализов, в том числе ПЦР на гепатит С.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это лабораторный метод определения ДНК и РНК. Впервые он был опробован почти полвека назад американцем Кэри Муллисом. Этот сверхчувствительный анализ способен определить носителя генома по одной исходной молекуле, содержащейся в крови, слюне или коже.

Метод ПЦР имеет огромные перспективы, находит применение не только в медицине, но и в генной инженерии, и в криминалистике. С его помощью клонируют и создают новые виды ДНК, определяют степень родства. По кусочку эпителия, найденного на месте преступления, устанавливают преступника.

Качественный анализ полимеразной цепной реакции — ПЦР на гепатит С определяет наличие или отсутствие ВГС в организме. В лабораторных условиях исследуется структура РНК, в составе которой и будет находиться вирус. В случае выявления вируса С необходимо пройти курс лечения, так как запущенное состояние печени в результате приведет к тяжелым последствиям.

Качественный ПЦР проводится и после выздоровления для подтверждения отсутствия антител. Назначается и для профилактического осмотра. При низкой концентрации возбудителя в крови ПЦР (качественный) может ничего не обнаружить, ведь у диагностической системы есть свои пороги чувствительности.

В случае начальной стадии болезни или легкой форме проводят ПЦР ультра диагностику на сверхчувствительном оборудовании.

Расшифровкой ПЦР-анализа и иммуноферментного анализа на гепатит С должен заниматься гепатолог или инфекционист. Анализировать результаты ПЦР необходимо в комплексе с данными биохимического анализа крови, биопсии и УЗИ. Только квалифицированный врач сможет проанализировать результаты исследований и, основываясь на них, назначить правильное лечение.

  • Расшифровка качественного анализа.

Обнаружено

В анализируемом биологическом материале обнаружен генетический материал возбудителя. Инфицирование подтверждено.

Не обнаружено

Инфицирование отсутствует, либо количество РНК возбудителя ниже границы чувствительности.

  • Расшифровка количественного анализа.

Не обнаружено

Нормальный показатель для здоровых людей. Означает, что в исследуемом материале отсутствует РНК гепатита С, либо его концентрация ниже порога чувствительности исследования.

До 1,8*10^2 МЕ/мл

Концентрация РНК ниже диапазона количественного определения. Такие результаты интерпретируют очень осторожно, соотносят их с данными других исследований, часто проводят повторное исследование.

До 8*10^5 МЕ/мл

Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается низким. Обычно снижение количества вируса означает, что терапия идет успешно.

Больше 8*10^5 МЕ/мл

Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается высоким.

Больше 2,4*10^7 МЕ/мл

Количество РНК выше верхнего предела диапазона количественного определения. Делать выводы о степени вирусной нагрузки при таком результате нельзя. Обычно в таких случаях тест повторяют с разведением образца крови.

  • Расшифровка генотипирования.

Обнаружена РНК определенного генотипа

В биоматериале обнаружен вирус гепатита С определенного генотипа и субтипа. Результат кодируется римскими цифрами и латинскими буквами, например — 1а, 2b. Всего существует семь генотипов и шестьдесят семь субтипов, однако в России встречаются только три первых типа.

Обнаружена РНК вируса гепатита С

В крови обнаружена РНК редкого для России генотипа, который нельзя отнести к первому, второму или третьему типу. Необходимы дополнительные исследования.

Не обнаружено

Данный результат говорит о том, что пациент здоров, или о том, что колчество РНК возбудителя слишком мала.

Возможна ситуация, когда ПЦР-анализ на гепатит С отрицательный, а иммуноферментный анализ распознает антитела против вируса. Это значит, что пациент переболел гепатитом С в острой форме и излечился самостоятельно. Примерно двадцать случаев инфицирования заканчиваются самопроизвольным излечением, если организм пациента оказывает достаточное сопротивление инфекции.

Несмотря на то, что ПЦР — высокоточный анализ, его результаты могут быть искажены в следующих ситуациях:

  • кровь транспортировалась в лабораторию в ненадлежащих условиях, был нарушен температурный режим;
  • образец биоматериала был загрязнен;
  • в крови находились остаточные следы гепарина и других антикоагулянтов;
  • в исследуемом веществе оказались ингибиторы — вещества, которые замедляют или останавливают полимеразную цепную реакцию.

Для ПЦР-анализа на гепатит С собирают венозную кровь. Обычно из вены пациента за один раз берут две порции крови: первую отправляют на ПЦР, а вторую на ИФА. Это делают для того чтобы более точно оценить, насколько сильно пациент заражен вирусом, и как иммунитет борется с ним.

Обычно от пациента требуют соблюдения следующих правил:

  • анализ крови сдают с утра;
  • перерыв между последним приемом пищи и сдачей крови должен составлять восемь-десять часов;
  • за два-три дня до анализа нужно отказаться от жареной и жирной пищи, и алкоголя;
  • в течение двадцати четырех часов перед анализом пациент должен избегать физических нагрузок: не переносить тяжестей, не посещать спортзал или бассейн.

ПЦР – исследование крови, которое позволяет обнаружить вирус гепатита С. Расшифровывается это сокращение так – полимеразная цепная реакция. Анализ помогает выявить присутствие возбудителя в организме путем увеличения части ДНК возбудителя в забранном биоматериале.

По результатам ПЦР можно диагностировать патологию спустя 10 дней после заражения. Это единственный анализ, который позволяет определить гепатит С на ранних стадиях развития. Такое исследование дает 100% достоверный результат благодаря сверхчувствительности.

Это исследование имеет такие преимущества:

  • Повышенная чувствительность к возбудителю патологии – благодаря этому анализ помогает выявить присутствие возбудителя в организме даже, если его содержание в крови невелико;
  • Анализ выявляется самого возбудителя заболевания, а не результаты его деятельности;
  • Определяет генотип вируса.

Выделяют два вида исследования для диагностики патологии: количественный и качественный. Эти анализы имеют принципиальные отличия.

Показания к проведению количественного исследования будут следующими:

  1. Выявление вирусной нагрузки к гепатиту С;
  2. Качественное исследование обнаружило наличие в крови антител к возбудителю заболевания;
  3. При обнаружении болезни в острой или хронической форме;
  4. Выбор метода терапии патологии;
  5. Оценка эффективности лечения и подбор другой методики при отсутствии положительного результата;
  6. Диагностика микст-гепатитов;
  7. Если качественный анализ дает положительный результат даже спустя 12 недель после начала курса терапии.

Прежде всего, исследование назначают для диагностики заболевания. Биоматериал рекомендуется сдавать при появлении симптоматики патологии:

  • Пожелтение эпидермиса, а также белков глаз;
  • Тошнота, сопровождающаяся рвотой;
  • Тяжесть и болевой синдром в правом подреберье;
  • Изменение цвета кала на светлый оттенок, а моча становится цветом темного пива;
  • Ломота в суставах;
  • Повышение температуры.

Норма количественного анализа на гепатит С может быть только одна – возбудитель отсутствует в крови человека. На бумаге это записывается как «не обнаружено». Если заболевание было диагностировано ранее, то нормой будет уменьшение концентрации вируса в крови.

Возбудитель присутствует в организме в определенных количествах и, исходя из этого, анализу дают определенную расшифровку, приведенную в таблице 1.

Особенности вирусного гепатита С

Среди воспалительных заболеваний, поражающих печень, особую угрозу для жизни человека представляет гепатит С. Причиной заражения может стать нарушение правил стерильности во время процедуры переливания крови. Намного реже инфицирование происходит в результате полового контакта, а также во время родов, когда болеющая мать заражает новорожденного.

 Коварство гепатита С в длительном отсутствии симптомов, которые могли бы помочь раньше начать лечение. Обычно признаки проявляются, когда болезнь переходит в самую тяжелую стадию, а цирроз или карциному уже сложно вылечить. 

Читайте также:  Как можно проверить пищевод — Заболевание желудка

Течение гепатита С, наличие которого выявляют анализом на HCV, может быть острым или хроническим. Именно острая форма часто не сигнализирует явными симптомами, а обнаруживают патологию по результатам диагностики других заболеваний.

С переходом острого гепатита в стадию хронической патологии, возможны следующие варианты развития болезни:

  • каждый пятый пациент выздоравливает после вовремя назначенного лечения;
  • часть больных переходит в группу носителей вируса (неактивная форма хронического заболевания);
  • у остальных заболевших прогресс хронической фазы подтверждают признаки поражения печени.

Момент перехода острого этапа в хроническую форму зафиксировать сложно. Причина в постепенном нарастании симптомов медленного поражения печени с отсутствием признаков желтухи.

Проявления HCV часто маскируются под симптоматику других заболеваний: повышенная температура, утомляемость, отсутствие аппетита. Потеря веса сопутствует скрытому прогрессированию болезни на протяжении десятков лет.

Популяция вируса скрытно поражает клеточную структуру крови, страдает также печень. Обнаружить фрагменты РНК возбудителя удается только при помощи ПЦР тестирования образцов крови на гепатит С.

Современные методики лечения новейшими препаратами позволяют не только вылечить патологию, но также избавить организм от вируса. Для этого необходимо установить его генотип и уровень концентрации в организме пациента.

Тест-системы некоторых лабораторий не оснащены соответствующими реагентами. Отсутствие возможности детерминирования субтипов генома приводит к выдаче результатов о невозможности типирования РНК.

В этом случае необходимо подтверждение диагноза методами дополнительных исследований с использованием основных маркеров гепатита. Обнаружение в крови человека иммуноглобулинов М и G сигнализирует о развитии в организме процесса, не характерного для здорового состояния.

Обозначенную ситуацию можно назвать первичным диагнозом, предупреждающим о необходимости комплексного обследования для получения объективной картины развивающегося процесса.

Количественная ПЦР – молекулярно-биологический анализ, при котором подсчитывается количество генетического материала возбудителя в крови. Исследование на гепатит С (количественно) выполняется после подтверждения диагноза для определения вирусной нагрузки. Полимеразная цепная реакция характеризуется высокой специфичностью и чувствительностью. Поэтому анализ считается золотым стандартом в диагностике гепатита С.

Инфицирование печени приводит к серьезным последствиям, особенно если речь идет о гепатите С. Это заболевание протекает бессимптомно и почти не поддается лечению, за что прозвано «ласковым убийцей». Достаточно одного контакта с кровью инфицированного человека, чтобы заразиться.

Вирус HСV может никак себя не проявить даже после инкубационного периода. Однако у некоторых больных всё же наблюдаются характерные симптомы гепатита С: вялость, боли в животе, боль в суставах, отсутствие аппетита, рвота, осветление кала, потемнение мочи, желтуха. Как правило, они появляются спустя 6–7 недель после инфицирования.

Для подтверждения или опровержения диагноза необходимо сдать кровь на анализ. Сначала делается скрининг-тест на наличие антител к вирусу HСV. (эти белковые вещества вырабатываются иммунной системой). Если результат положительный, исследование продолжается. Применяется метод полимеразной цепной реакции (ПЦР), отличающийся высокой точностью.

Вирусная нагрузка при гепатите С – мера тяжести заболевания, которая определяется путем подсчета количества вирусов в 1 миллилитре крови. Показатель выражается численно, а измеряется в международных единицах на 1 мл (МЕ/мл). Инфекционная нагрузка указывает степень инфицирования, концентрацию вирусных частиц в организме и влияет на вероятность человека заразить окружающих.

Вирусная нагрузка — это количество или содержание в крови больного вирусных рибонуклеиновых кислот (генетического материала). Опираясь на количество найденных клеток РНК, можно стадию развития вируса и не инфицирует ли он новые клетки.

Этот тест должен проводиться в случае, если у больного обнаружены антитела на ВГС. Количество клеток с генетическим материалом измеряется на один миллилитр крови.

После проведения такого теста вы узнаете вы узнаете о собственном диагнозе «гепатит С», либо отсутствии оного.

Гепатит С расшифровка анализа

Показания для ПЦР-диагностики

Основной способ инфицирования гепатитом – через кровь. Вирусные агенты, оказавшись в здоровой клетке, вместе с кровотоком достигают печени, где активно размножаются.

Накопление вирионов в зараженных гепатоцитах приводит к разрушению печеночных клеток. Процесс стимулирует выработку антител, которые вступают в борьбу с неповрежденными гепатоцитами, утяжеляя последствия болезни.

Самым надежным способом, позволяющим обнаружить в крови следы вируса, специалисты называют ПЦР анализ. Суть революционного метода полимеразной цепной реакции состоит в обнаружении цепочек вирусных РНК при создании определенной среды, куда помещают взятую на анализ пробу крови. Этапы диагностического процесса:

  1. После получения отобранного биоматериала в нем тиражируют множество копий РНК, принадлежащих вирусу гепатита С.
  2. Использованием многофункциональных тестовых систем с нагреванием и очисткой раствора добиваются необходимого количества копий.
  3. При помощи тестовой диагностики определяют концентрацию в анализируемом образце сформировавшихся генов.

Под аббревиатурой РНК подразумевают рибонуклеиновую кислоту. Важная макромолекула вместе с ДНК присутствует в составе клеток любого живого организма. Молекула РНК, хранящая генетический код вируса гепатита С, склонна мутировать. 

В процессе нескольких этапов диагностики происходит трансформация нуклеотидных цепочек с формированием РНК вируса гепатита С, если порция крови пациента содержала фрагменты возбудителя.

Безоговорочная достоверность ПЦР тестирования объясняется высоким уровнем чувствительности полимеразной реакции, обладающей следующими преимуществами:

  • Для обнаружения HCV достаточно одного генома вируса на весь объем биоптата;
  • Высокая способность к генотипированию для выявления определенного возбудителя;
  • Возможность за одно тестирование обнаружить РНК различных типов вирусов.

Проведение лабораторного анализа вооружает специалиста информацией о наличии либо отсутствии РНК вируса в пробе крови. Благодаря тестированию можно определить концентрацию РНК различных типов вирусных частиц.

ПЦР-диагностика показана пациентам:

  1. при подозрении на воспаление печени без проявления симптомов патологии;
  2. для проведения скрининга во время профилактических мероприятий;
  3. в ходе обследования людей после контакта с инфицированным человеком;
  4. при хроническом гепатите для оценки активности размножающегося вируса;
  5. для выяснения степени эффективности проведенной терапии.

Сдавать анализ на выявление вирусного РНК обязательно должны пациенты, болеющие циррозом. Диагностика ПЦР показана людям, имеющим инфицированных гепатитом С родственников или половых партнеров.

В группу риска также водят дети, рожденные от матерей, имеющих печеночную патологию. Анализ необходим при хронических болезнях печени неустановленной природы.

Подготовка к сдаче биоматериала

https://www.youtube.com/watch?v=jJEbj6Tm-tM

Для получения достоверного результата, рекомендуется придерживаться некоторых правил сдачи биоматериала:

  • Исследование проводят в утренние часы на пустой желудок, поэтому перед сдачей крови нельзя ничего кушать, а пить можно только простую негазированную воду, при этом разница между посещением лаборатории и ужином должна составлять не менее 8 часов;
  • За два дня до сдачи биоматериала отказываются от распития спиртных напитков;
  • За три дня до посещения лаборатории из рациона убирают всю так называемую вредную пищу – жирное, жареное, соленое, острое;
  • За сутки прекращают медикаментозную терапию, в том случае, если прервать лечение невозможно, об этом сообщают врачу, который дал направление на анализ, а также лаборанту;
  • Накануне исследования нельзя делать рентген, проходить УЗИ, физиотерапию и делать массаж;
  • За сутки до сдачи биоматериала избегают чрезмерной физической нагрузки и эмоциональных встрясок;
  • За полчаса до исследования прекращают курить.

Если все правила соблюдены, можно рассчитывать на получение достоверных результатов исследования.

Норма количественного этапа исследования

После количественной полимеразной цепной реакции, данные о вирусной нагрузке на печень и организм в целом отображают в бланке. Количество РНК возбудителя выражается как МЕ/мл (международные единицы/миллилитры). Данные обычно выводятся в виде таблицы, в которой представлены:

  • норма количественного ПЦР при гепатит С;
  • полученный результат;
  • другие параметры.

alt

Значения показателей вирусной нагрузки при гепатите С

Показатель Интерпретация
Отрицательный РНК возбудителя в биологическом материале не обнаружено
0 — 1,8Х10^2МЕ/мл Количество генетического материала вируса ниже установленного референтного значения
1,8Х10^2МЕ/мл — 8Х10^5МЕ/мл Невысокая вирусная нагрузка.
8Х10^5МЕ/мл — 2,4Х10^7МЕ/мл Высокая вирусная нагрузка
2,4Х10^7МЕ/мл и более Превышена верхняя граница значений.

Показатели отчасти зависят от типа и чувствительности теста. Поэтому расшифровать результат анализа может только доктор, который учитывает все параметры.

Лечащий врач, исходя из результатов анализов, собранного анамнеза, клинических признаков подберёт противовирусную терапию. Интенсивность её будет зависеть от количества найденного генотипа вируса в образце.

ПЦР-исследование назначают в следующих случаях:

  • контакт с больным человеком, при котором могло произойти заражение;
  • положительный результат иммуноферментного анализа;
  • признаки цирроза печени: изменение размеров печени, увеличение селезенки, появление на животе подкожного венозного сплетения;
  • появление симптомов поражения печени: боли в правой части живота, пожелтение кожных покровов;
  • повышение активности АЛТ и АСТ в биохимическом анализе крови;
  • перед началом лечения для определения вирусной нагрузки;
  • с целью контроля за эффективностью антивирусной терапии;
  • после окончания лечения для контроля за рецидивами;
  • при наличии диагностированного гепатита B, для исключения смешанного поражения печени.
Интерпретация исследования Концентрация возбудителя в крови, МЕ/мл
Низкая концентрация От 600 до 3*104
Средняя концентрация От 3*104 до 8*105
Высокая концентрация Выше 8*105

Об отсутствии заражения можно говорить только в том случае, если в крови нет возбудителя патологии. Низкая концентрация вируса указывает на то, что болезнь только начинает развиваться или на то, что проводимая терапии дала положительный результат.

Не всегда анализ показывает достоверный результат. Ошибки чаще всего возникают по следующим причинам:

  • Человеческий фактор. Ошибку может совершить лаборант во время проведения исследования или неправильно подготовить оборудование и образцы для выполнения анализа;
  • Неправильная подготовка к сдаче биоматериала. Если нарушать режим питания или не отказаться, то это может повлиять на состав крови. В результате интерпретация исследования будет ложноположительной или ложноотрицательной;
  • Обнаружение в биоматериале гепарина. Это вещество, которое не дает крови сворачиваться;
  • Обнаружение в биоматериале ингибиторов. Это вещества, которые тормозят физико-химические процессы.
Читайте также:  Лечение гепатита с народными средствами

Чтобы избежать ложноположительного или ложноотрицательного результата, рекомендуется соблюдать правила сдачи биоматериала и проводить исследования только в диагностических центрах с хорошей репутацией.

Однако даже в этом случае существует вероятность неправильной интерпретации анализа. По этой причине рекомендуется сдать крови на исследование ни один раз.

  • 1-я неделя терапии;
  • Спустя месяц после начала лечения;
  • 12-я неделя терапии;
  • Через 6 месяцев после начала терапии.

Лечение считается эффективным в том случае, если спустя 3 месяца после начала употребления медикаментозной терапии вирусная нагрузка уменьшается в 2 раза. Если исследование биоматериала показало иной результат, подбирается иное лечение.

Если есть подозрение на гепатит С, количественный анализ поможет определить наличие или отсутствие вируса в крови. Расшифровка результатов указывает не только на заражение, но и показывает эффективность проводимого лечения.

Вирус гепатита С способен размножаться в клетках крови и вызывать лимфопролиферативные болезни. Благодаря множественным мутациям иммунная защита организма ослабевает, возникают генотипы и субтипы вируса.

При правильном и своевременном определении конкретного вида зависит эффективность противовирусной терапии. Опасность инфицирования состоит в том, что болезнь протекает бессимптомно.

Всего в 15 процентах из 100 могут наблюдаться тошнота и рвота, похудением и повышением температуры.

Гепатит С, а именно РНК-вирус семейства Togaviridae, крайне стойкий, передается путем переливания крови или использования нестерильных предметов, неправильная гигиена ванных принадлежностей и др.

Количественный анализ позволяет исследовать кровь и выявить генетическую структуру инфицируемого вируса.

Чтобы гепатит С и его генотипы были определены, проводят количественный анализ. В зависимости от анализатора могут определить три уровня заболеваемости РНК-вирусом.

Субтипы могут производить различные модификации, поэтому специфика и чувствительность анализатора должна быть на сто процентов. Помимо обнаружения болезни у пациента, необходимо определить степень его тяжести. Некоторые лаборатории не имеют полностью всех данных по расшифровкам РНК-вируса, есть вероятность ложноположительного ответа.

Обратив внимание на результаты этих показателей и общее состояние организма, выводится результат, показывающий степень зараженности, форму, а также количество клеток гепатита С в крови. Это способствует процессу выздоровления и эффективности противовирусной терапии.

Гепатит С – один из семи видов вирусных гепатитов. По оценкам Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) этой болезнью страдают около 150 000 000 человек в мире, более полумиллиона ежегодно погибают от неё. Несмотря на то, что во всём мире предпринимаются меры по борьбе с гепатитом, число заболевших неуклонно растёт.

Гепатит С вызывается вирусом HCV рода Flavivirus. Он выделен учеными в 1989 году. Имеет шесть генотипов и пятьдесят серотипов (специфических антител генотипа). Вирус очень коварен, его трудно обнаружить в крови, он выживает в условиях, которые не выдерживают многие другие вирусы и даже способен мутировать, что, несомненно, затрудняет его обнаружение.

Вирус настолько приспособлен к жизни в организме человека, что комфортно чувствует себя во всех его биологических жидкостях: крови, слюне, молоке, моче, сперме, вагинальном секрете.

Это позволяет ему проникать в организм здорового человека любым из многочисленных способов: от незащищённого полового контакта до бытового взаимодействия с инфицированным человеком.

Анализ ПЦР гепатит С – это исследование, основной целью которого является идентификация генетического материала возбудителя. Анализ выявляет возбудитель заболевания методом использования полимеразной цепной реакции. Данная диагностика отличается высокой степенью точности, специфичностью к выявлению отсутствия или наличия вирусной инфекции.

Чтобы провести ПЦР анализ на определение вируса гепатита С у пациента берётся венозная кровь, которая потенциально содержит в себе РНК (рибонуклеиновая кислота) HCV искомого вируса.

Тест ПЦР на гепатит С подразумевает порядок действий, когда в частицы крови пациента добавляют:

  • праймеры (короткие искусственно-синтезируемые участки необходимо гена);
  • специальный фермент (РНК-полимераза).

После забора биологический материал отправляется на исследования в лабораторию. Одна порция крови нужна для проведения непосредственно ПЦР анализа, вторая – отправляется на исследование по методу ИФА.

Фермент способен за короткое время увеличить численность генетического материала вируса возбудителя. В специальном аппарате проводится несколько циклов тепловых и охлаждающих процессов.

Обратите внимание

На конечном этапе полученный материал сопоставляется с генами вируса и делается заключение о наличии или отсутствии патологии в организме пациента.

Суть и проведение ПЦР анализа в лаборатории. Снято каналом SiberianMedicalLaboratory.

У 75–80 % болезнь переходит в хроническую форму, что вызывает фиброз печени — состояние, при котором ткани печени заменяются соединительной тканью. Фиброз, в свою очередь, приводит к раку или циррозу. Основной путь передачи заболевания — через кровь.

Если у человека имеются показания к проведению теста на гепатит С, ему проводят два основных теста. Определяют антитела к вирусу, и при их отсутствии считается, что гепатита у него нет.

Если же в крови обнаруживается наличие антител к вирусу гепатита, проводится анализ методом ПЦР.

РНК таким методом определяется в крови уже через 10–12 дней после инфицирования и свидетельствует о том, что вирус активно размножается в организме. В этот период обнаружить вирус другим способом просто невозможно, так как специфических антител он еще не вырабатывает и поражения печени еще незаметны при биохимических анализах и биопсии.

Гепатит С, а именно РНК-вирус семейства Togaviridae, крайне стойкий, передается путем переливания крови или использования нестерильных предметов, неправильная гигиена ванных принадлежностей и др.

Заболевание под названием гепатит может серьезно поразить печень и вызвать сильное воспаление.

Существует несколько типов гепатита, а вирусы, которые провоцируют развитие заболевания могут делиться по генотипу в зависимости от мутации и географического расположения. Один из распространенных видов заболевания это тип С.

Количественный анализ на гепатит С, расшифровка которого проводится лечащим врачом, может протекать в острой форме или перейти в хроническую.

В последнее время в поисковиках интернет-ресурсов все чаще появляется запрос «количественный анализ на гепатит с расшифровкой».

Действительно, вирус гепатита распространен и опасен, заболевание поражает печень. Название его произошло от лат. hepatitis — воспаление печени. Заражение происходит через кровь либо половым путем, чаще болеют взрослые люди в возрасте от 25 до 50 лет.

Выделяют несколько типов этого заболевания. Гепатит С не имеет яркой выраженности, но в 40–70% случаев переходит в хроническую форму, способен вызвать цирроз печени и рак. Это заболевание требует точного диагностирования и расшифровки полученных данных, для чего разработаны методики. Одна из них — РНК-анализ HCV RNA методом ПЦР.

alt
Анализ поможет подобрать лечение при обострении.

Ложный результат

  • Сначала методом качественного тестирования пытаются обнаружить следы вируса.
  • Результаты количественного теста уточняют концентрацию в пробе вирусной РНК.
  • Методом генотипирования устанавливают, к какому генотипу принадлежит возбудитель.

Ряд медиков считает диагностику на РНК вирусного гепатита обязательной для большинства пациентов, даже не имеющих характерных для патологии симптомов. Появление определенных жалоб уже свидетельствует о запущенном процессе с поражением печени циррозом, некрозом, онкологией.

В домашних условиях можно самостоятельно выполнить несложную диагностику гепатита, пользуясь экспресс-тестом ИФА. Тестовый комплект позволяет определить наличие антител к РНК вируса всего за 15 минут по капле крови. При выявлении антител потребуется дальнейшее обследование.

Задача начального этапа исследования – подтвердить наличие в тестируемом объеме генетических фрагментов HCV, если анализ крови показал наличие у пациента антител, готовых атаковать вирус гепатита С. Интерпретация результатов качественной диагностики имеет две позиции, с их особенностями важно ознакомиться:

  1. «РНК обнаружено». Положительный вариант результата указывает, что биологическая жидкость содержит фрагменты РНК возбудителя гепатита. Интерпретация показателя является подтверждением факта инфицирования: вирус размножается в крови носителя, печень подвергается разрушению.
  2. «РНК не обнаружено». При отрицательном варианте результата сохраняется вероятность малой концентрации вирусной РНК даже при явном отсутствии ее фрагментов. Тест не сможет выявить ничтожную концентрацию вирионов при недавнем заражении либо предшествовавшей противовирусной терапии.

Обнаружения РНК возбудителя по методике качественного тестирования, обеспечивающего 95% точности, достаточно для подтверждения гепатита С. Достоверность качественного этапа анализа ПЦР обеспечивает система с определенным порогом чувствительности (до 500 МЕ/мл).

При низкой виремии (концентрация вируса) потребуется помощь диагностической системы с показателем минимум 50 МЕ/мл. По результатам следующей части анализа определяют концентрацию вирионов в объеме исследуемого биоматериала.

В отличие от методов выявления серологических маркеров, ПЦР мало зависит от сопутствующих заболевания и общего состояния организма пациента.

Но если подтвержден вирус гепатита С, количественный анализ, расшифровка которого проводится врачом, обязателен.

HCV – тяжелое заболевание, требующее серьезной дорогостоящей и опасной побочными реакциями терапии. Поэтому диагноз никогда не ставят на основании результатов одного исследования. При подозрении на наличие вирусного заболевания пациенту приходится пройти несколько тестов. Но чтобы избежать лишних затрат и потери времени, анализы крови и инструментальные обследования проводят поэтапно.

Читайте также:  Дисфагия пищевода: причины, симптомы и лечение
Проводимое исследование Цели выполнения
Биохимический анализ крови и печеночные пробы Позволяет оценить функциональную активность печени, уровень билирубина, показатели печеночных трансаминаз. Превышение нормы в 2 раза и более указывает на наличие заболевания
Клинические анализы крови, мочи и кала Данные исследования неспецифичны, но по результатам можно установить наличие воспалительного процесса, оценить общее состояние пациента. Обнаружение билирубина в моче, изменение оттенка кала говорит в пользу поражения печени
Иммуноферментный анализ (ИФА) Позволяет определить как наличие вирусной инфекции в организме, так и ее форму (острую или хроническую). Недостатком исследования является вероятность ложных результатов
Полимеразная цепная реакция Дорогостоящий, сложный в проведении, но вместе с тем наиболее точный метод диагностики HCV. Позволяет подтвердить наличие вируса в организме человека, количественно установить уровень копий РНК, определить генотип HCV
Инструментальные обследования печени Необходимо проведение УЗИ органов брюшной полости, установление стадии фиброза, оценка тяжести цирроза, исключение гепатоцеллюлярной карциномы

Окончательный диагноз доктор ставит только по результатам, указанным во всех исследованиях. Некоторые препараты, например, гепатопротекторы, витамины показаны уже в начале диагностического процесса. Но таргетные противовирусные средства назначают после получения всех данных.

  1. «обнаружено» означает, что в пробе концентрация вируса выше значения чувствительности диагностического оборудования;
  2. «не обнаружено» свидетельствует о незначительном присутствии возбудителя или полном его отсутствии.

Оценку количественной нагрузки делает инфекционист. Цифровой показатель 8*10^5 МЕ/мл означает высокую вирусную нагрузку. При значении 1,8*10^2 МЕ/мл однозначно определить, активен ли вирус, нельзя, проводятся повторные исследования, о течении болезни судят по динамике изменения показателей.

Когда значение выше 2,4*10^7 МЕ/мл, результаты перепроверяются при уменьшенной концентрации пробы. В результатах анализа на генотипирование указывается разновидность вируса (1а, 2а, 2в). Когда концентрация вируса незначительная, делается пометка «не обнаружено».

ПЦР рассматривается вместе с результатами других исследований. Если качественный результат отрицательный, а в крови повышена концентрация специфических белков, вырабатываемых против возбудителя, это значит, организм самостоятельно поборол инфекцию. По статистике, каждый пятый больной гепатитом С способен противостоять инфекции без медикаментозных вмешательств.

Существует понятие «ложноположительный результат», он бывает при аутоиммунных заболеваниях, когда у больного есть системные заболевания или в крови присевают другие вирусы.

Но если подтвержден вирус гепатита С, количественный анализ, расшифровка которого проводится врачом, обязателен.

HCV – тяжелое заболевание, требующее серьезной дорогостоящей и опасной побочными реакциями терапии. Поэтому диагноз никогда не ставят на основании результатов одного исследования. При подозрении на наличие вирусного заболевания пациенту приходится пройти несколько тестов. Но чтобы избежать лишних затрат и потери времени, анализы крови и инструментальные обследования проводят поэтапно.

Анализ рнк вируса гепатита с

Здравствуйте! Мой брат 1978 г. р. в 2006 году перенес вирусный гепатит С, средне-тяжелая форма(желтушная), лечения сразу не назначили,только диета ,т.к. печеночные показатели пришли в норму и посоветовали через некоторое время сдать необходимые анализы и тогда решать вопрос о лечении ,и выборе терапии.

На протяжении всего этого времени брат сдает анализы, общ.анализ крови, мочи ,УЗИ, биохимия крови ( комплексная диагностика заболеваний печени, белковые фракции),РНК вируса гепатита С и анализ на антитела.Все показатели в норме. но присутствуют антитела.

Антитела IgG- ОБНАРУЖЕНО Антитела IgM- НЕ ОБНАРУЖЕНО РНК вируса гепатита С ( качественное)- НЕ ОБНАРУЖЕНО Количественный анализ и генотип сказали сдавать не надо, так как сам вирус в крови отсутствует,одним словом нет вируса в крови такое продолжительное время ,а мы сдавали не один раз, значит нет болезни,скажите пожалуйста,насколько верно это утверждение и какие еще обсследование необходимо пройти,чтобы окончательно успокоиться.

К чему приводит носительство антител? Надо ли сдавать анализ к неструктурным и ядерным белкам, при отрицательном РНК вируса?Все анализы брат сдает в Центре молекулярной диагностики и эпидемиологии в г. Москве.

Может ли быть, что вирус не обнаруживается в крови, а заболевание перешло в хроническую форму(латентная). а мы сидим сложа руки.Помогите. что делать ведь время идет, а ответ один, раз вируса в крови нет. значит все нормально.

наблюдайтесь, но как понять насколько нормально.Может сделать фиброскан? Бывает же спонтанное излечение в 10-20% случаев, а антитела присутствуют всю жизнь,хотелось бы верить, что так бывает.Одним словом ждем вашего совета.

https://www.youtube.com/watch?v=WckrECLnx3I

Сопутствующих заболеваний нет, чувствует себя нормально, но иногда бывает тяжесть в животе.Противовирусная терапия не проводилась Заранне спасибо.

Вирусный гепатит С (ВГС) — инфекционное заболевание с парентеральным механизмом передачи, возбудителем которого является РНК-содержащий вирус гепатита С. Инкубационный период — в среднем 6-8 недель. Заболевание характеризуется высокой частотой формирования хронических форм и последующим развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы.

Выявление РНК ВГС является подтверждением острого или хронического гепатита С. Определяется в крови со 2-й недели инфицирования, появляется раньше anti-HCV, что позволяет диагностировать заболевание на ранних сроках. Определение РНК проводится у лиц с клиникой острого гепатита и лиц с положительными результатами определения anti-HCV.

  • Референсные значения: не обнаружено.
  • Аналитическая чувствительность теста: 100 МЕ/мл РНК вируса гепатита С.
  • Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом ФЗ № 323 «Об основах защиты здоровья граждан в Российской Федерации», должны производиться врачом соответствующей специализации.
  • Выявление РНК вируса гепатита С – доказательство инфицированности ВГС.
  • Результаты лабораторных исследований при различных вариантах инфекции, вызванной ВГС*
  • *Рекомендации по диагностике и лечению взрослых больных гепатитом С, .

* Цена указана без учета стоимости взятия биоматериала. При единовременном заказе нескольких услуг, услуга по сбору биоматериала оплачивается только один раз.

Hepatitis C virus by PCR, HCV RNA

Гепатит С – это серьезное для любого человека заболевание, поражающее печень. Вызывается патология флавивирусом HCV, в структуре которого присутствует молекула РНК, что и несет общий генетический код вируса.

Патология может быть разной формы, все прямо зависит от общего состояния человека и особенностей каждого индивидуального организма.

Подобная структура дает возможность проводить анализ ПЦР на наличие в организме вируса категории гепатита С.

Он позволяет своевременно определить опасный для человека вирус, пройти курс лечения лекарственными препаратами и восстановить здоровье, защитив организм от разрушения печени.

Вирус HCV может проявляться, как в острой – опасной форме, так и в хронической. Если у человека в тот или иной момент был обнаружен данный вирус, ему в обязательном порядке назначается анализ ПЦР.

Даже людям, не сталкивавшимся с гепатитом С, необходимо знать, что возбудитель смертельно опасного заболевания имеет несколько генотипов. Благодаря прогрессивным методикам исследований удалось обнаружить 11 генотипов вируса гепатита С, но наиболее распространенных всего 6 видов.

Каждому типу генома, имеющему определенные характеристики, дали буквенное наименование и присвоили статус квазивирусов.

Из-за постоянных мутаций, обеспечивающих способность вируса к выживанию в окружающей среде, иммунная система человека не успевает быстро распознать очередного мутанта, чтобы вырабатывать к нему антитела. Это объясняет высокую опасность заболеть гепатитом С, а вакцинация против печеночной патологии сегодня только на стадии разработки.

Жители Европы и Америки подвержены опасности инфицирования 1 и 2 генотипом HCV. Геном 3, имеющий два субтипа (3а и 3в), медики называют самым распространенным на планете. Жителям азиатских стран угрожает 4 и 6 тип генома возбудителя инфекционной болезни. 

При подозрении на инфицирование гепатитом С надо обязательно проконсультироваться с врачом. Если проведена диагностика, а ПЦР положительная или её количественные показатели говорят о наличии вирусной нагрузки, это однозначно повод безотлагательно посетить медучреждение.

Доктор, расшифровав результаты анализов, назначит лечение. Правильно выбранные лекарства, техника терапии, своевременное начало приёма медикаментов помогут избежать патологических изменений структуры и работы печени.

Гепатит С — тяжёлое вирусное заболевание, которое может привести к необратимым последствиям для человека. Ранняя, точная диагностика (количественный ПЦР) даёт возможность увеличить вероятность выздоровления в несколько раз.

АлАТ, АсАТ; ЩФ; ЛДГ.

09.04.2018

Когда необходимо определить наличие вируса гепатита С в организме, следует провести анализ РНК, расшифровка которого и даст нужную информацию.

С помощью этого анализа можно выяснить, есть ли у пациента следы заболевания, а также определить, как далеко оно зашло, о каком именно типе патологии идет речь.

После выяснения этой информации можно назначать терапию наиболее подходящего вида.

Когда необходимо определить наличие вируса гепатита С в организме, следует провести анализ РНК, расшифровка которого и даст нужную информацию

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *